タグ: #UHPLC

8 件の記事

LC装置本体の選び方 ― カタログの耐圧より、ドウェル容量がメソッドの移管可否を決める【2026年版】

LC装置本体の選び方 ― カタログの耐圧より、ドウェル容量がメソッドの移管可否を決める【2026年版】

LC 装置のカタログを開くと、まず目に入るのは最高使用圧力である。だが装置を入れ替えたときに実際に困るのは 圧力ではない。**グラジエントが形成される点からカラム先端までの容量 ―― ドウェル容量**である。 Waters は同社システム間のペプチドマッピング移管で、Arc Premier(1080 µL)から Alliance iS Bio(1669 µL)へ 移したときに保持時間が 0.64 分ずれたと報告している。差は 589 µL。この 0.6 mL 弱が、システム適合性を 落としうる。しかも影響は一様ではなく、ドウェル容量が小さいと早く溶出するピークの分離は悪くなり、 遅く溶出するピークの分離は良くなる。混合モード相では溶出順序そのものが変わった例もある。 本記事は、ドウェル容量の定義と 2 通りの測り方、実機の公称値、移管時に起きること、差の容量ぶんだけ グラジエントを前倒しする補正、高圧混合と低圧混合の選択、定流量と定圧の違い、1250〜1500 bar という 現行の耐圧が何を買うのか、そして 2 µL² の装置分散がピーク生成速度を半分にする話までを、原著の数値で追う。

LC検出器の選び方 ― 「ダイナミックレンジ4桁」は「直線範囲4桁」ではない【2026年版】

LC検出器の選び方 ― 「ダイナミックレンジ4桁」は「直線範囲4桁」ではない【2026年版】

LC検出器の選定は、まず「発色団があるか」で分岐する。無ければ RI・ELSD・CAD といったユニバーサル検出器に 進むが、そこからカタログの数字が急に読みにくくなる。CAD の「ダイナミックレンジ4桁」は、Thermo 自身の技術資料に 「準直線なのは 1.5〜2 桁だけ」と書かれている。ELSD の検出限界は減衰設定ごとに変わる。そして両者とも非線形なので、 高濃度標準1点から S/N を外挿した検出限界は「completely meaningless」だと、そのメーカー自身が明言している (実測では外挿値と実測値が 5〜13 倍ずれた)。本記事は Agilent・Waters・Thermo の仕様書と技術資料、 そして査読論文を原典で確認し、ノイズ仕様がなぜ横並び比較できないのか、光路長と分散のトレードオフ、 蛍光検出器のカタログに「>500」と「>3000」が併記される理由、そして UHPLC でセル容量とデータ収集速度が どこまで効くのかを、数値で整理する。

HILIC徹底解説 ― 逆相で保持しない極性化合物を、水層と平衡化から攻略する【2026年版】

HILIC徹底解説 ― 逆相で保持しない極性化合物を、水層と平衡化から攻略する【2026年版】

逆相で保持しない極性化合物を分離する手段がHILIC(親水性相互作用クロマトグラフィー)である。 高有機溶媒の移動相を使い、固定相表面に形成される水に富んだ層への分配で保持する——という説明が 広く使われてきたが、2023年の定量的な研究は、分配が支配的な化合物と表面吸着が支配的な化合物が 混在することを示している。本記事では保持機構を最新の知見で整理し、固定相・移動相・緩衝液の選び方、 そして実務で最も事故が多い「試料希釈液」と「平衡化」——新品カラムに60〜80カラム容量が必要という 逆相の常識との違い——を、メーカー公式ガイドと論文を根拠に解説する。

HPLCトラブルシューティング ― 圧力・保持時間・ピーク形状を体系的に切り分ける【2026年版】

HPLCトラブルシューティング ― 圧力・保持時間・ピーク形状を体系的に切り分ける【2026年版】

HPLCの不調は、背圧・保持時間・ピーク形状・ベースラインという限られた症状に集約される。 しかし同じ症状でも原因は装置・カラム・移動相・試料に散らばっており、思いつきで手を動かすと 遠回りになる。本記事は切り分けの手順を軸に、圧力上昇の犯人を下流から順に特定する方法、 温度1℃で保持時間が1〜3%動くという事実、平衡化を「時間」ではなく「カラム容量」で考える理由、 テーリングの化学的原因と物理的原因の分け方、ブランクグラジエントによるゴーストピークの発生源特定、 そして500〜2000注入というカラム寿命を伸ばす運用までを、公開されている技術資料を根拠に整理する。

JP19 クロマトグラフィー総論〈2.00〉 ― SN比の改正と、公定法で「条件を変えてよい」範囲【2026年版】

JP19 クロマトグラフィー総論〈2.00〉 ― SN比の改正と、公定法で「条件を変えてよい」範囲【2026年版】

第十九改正日本薬局方(JP19)が2026年4月10日に告示・同日施行された。改正された 一般試験法19項目の筆頭がクロマトグラフィー総論〈2.00〉で、その中身はSN比の計算法の改正 ――ノイズ測定範囲が「半値幅の20倍」から「少なくとも5倍」へ一本化された。本記事では この改正点を原文で確認したうえで、〈2.00〉の実務的な本体である「4. クロマトグラフィー条件の調整」 を読み解く。L/dp の −25%〜+50%、流量・注入量・グラジエント時間の換算式、温度やpHの許容幅、 そして変えてはいけないもの。公定法を再バリデーションなしでどこまで速くできるのかを、 条文の数値に基づいて整理する。

UHPLCカラム技術の深掘り ― 有効粒子径・動力学プロット・耐圧・金属不活性化【2026年版】

UHPLCカラム技術の深掘り ― 有効粒子径・動力学プロット・耐圧・金属不活性化【2026年版】

UHPLCカラムを「どれを買うか」ではなく「なぜ効くか」の工学から深掘りする技術記事。 コアシェル粒子の正体を有効粒子径(de)で定量的にとらえ、van Deemterの先にある 動力学プロット(kinetic plot)で「時間×効率×圧力限界」を一枚で読む。sub-2µm粒子が UHPLC専用機を要求する理由(背圧∝1/dp²・摩擦熱と縦横の熱勾配)を実測データで示し、 2020年代の新しい軸である金属不活性化カラム(MaxPeak HPS等)がオリゴ核酸・リン酸化合物の 回収率をどう変えるかまで、2025年の新製品を実例に整理する。入門者と分析現場の両方に向けて。

HPLC/UHPLCカラムの選び方 ― 分離モード・固定相・粒子・細孔径で迷わない実践ガイド【2026年版】

HPLC/UHPLCカラムの選び方 ― 分離モード・固定相・粒子・細孔径で迷わない実践ガイド【2026年版】

HPLC/UHPLCのカラム選びを、現場で迷わないための意思決定の順番で整理する実践ガイド。 まず分離モード(逆相/HILIC/SEC・IEX)を分析対象の極性・分子量から決め、次に固定相化学 (C18/C8/フェニル/PFP/HILIC)とUSP L分類、シリカ・ハイブリッド(BEH)・コアシェルの違い、 粒子径とvan Deemter・背圧のトレードオフ、細孔径(小分子100Å/タンパク質300Å)、 カラム寸法、メソッド移管の勘所までを、入門者と分析現場の両方に向けて解説する。

【2026年版・徹底解説】クロマトグラフィー最新技術動向 ― カラム物理から2D分離・SFC・水素GCまで

【2026年版・徹底解説】クロマトグラフィー最新技術動向 ― カラム物理から2D分離・SFC・水素GCまで

クロマトグラフィーの最新動向を、装置カタログの紹介にとどめず「なぜそうなるか」の物理から解説する保存版。 van Deemter式とピークキャパシティの基礎、表面多孔質(コアシェル)粒子がsub-2µm全多孔質に背圧半分で匹敵する理由、 UHPLCの摩擦熱と系内拡散の限界、二次元分離(LC-LC/mLC-LC/LC×LC)の直交性とアクティブ溶媒モジュレーション、 mAb・オリゴ核酸のバイオ医薬応用、SFC/UPC2、GCの水素キャリアガス移行とGC×GC、検出器とグリーン分析化学まで、 入門者の足場と専門家の読み応えを両立させて2024〜2026年の最前線を整理する。